PESQUISA VETERINÁRIA BRASILEIRA

Abstract in English:

ABSTRACT.- Guimarães G., França C.A., Krug F.S., Peixoto R.M., Krewer C.C., Lazzari A.M. & Costa M.M. 2012. [Phemotypic characterization, biofilm production and antimicrobial resistance of Staphylococcus spp. Isolates from cattle and buffaloes mastitis.] Caracterização fenotípica, produção de biofilme e caracterização da resistência aos antimicrobianos em isolados de Staphylococcus spp. obtidos de casos de mastite em bovinos e bubalinos. Pesquisa Veterinária Brasileira 32(12):1219-1224. Universidade Federal do Vale do São Francisco, Campus Ciências Agrárias, Rodov. BR 407 Km 12, Lote 543, Projeto de Irrigação Senador Nilo Coelho s/n, Petrolina, PE 56300-990, Brazil. E-mail: mateus.costa@univasf.edu.br The aim of the present study was to evaluate the antimicrobial susceptibility pattern and to perform the phenotypic and genotypic characterization of the Staphylococcus spp. isolates from mastitis cases in cattle (n=30) and buffaloes (n=30). The susceptibility to antimicrobial drugs was performed by disk diffusion test and the presence of efflux pump was evaluated in Mueller Hinton (MH) Agar supplemented with ethidium bromide as well as by detection of msrA gene. Similarly, the PCR technique was done to detect mecA, blaZ and ermA, B e C genes, that were related after with the presence of antimicrobial resistance in disk diffusion test. The formation of biofilm was characterized using Congo Red Agar (CRA), microplate adherence and detection of icaD gene. Staphylococcus spp. isolates shown high antimicrobial susceptibility in disk diffusion test. The multidrug resistance (MDR) rate ranged from 0 and 0,5. In the efflux pump test, 26.7% of Staphylococcus spp. strains were positive in phenotypic method and 6.7% in PCR for msrA gene. The erm, mecA and blaZ genes were detected in 1.7%, 6.7% and 11.7% of Staphylococcus spp. strains respectively. In biofilm production tests, 23.3% of the samples were positive in CRA, 50% in microplate adherence test and 8.3% in icaD gene PCR. The cattle isolates were less sensitive to antimicrobial drugs when compared to the buffaloes ones. The characterization of these isolates is very important to guide a successful antimicrobial therapy. The biofilm presence in the isolates may be associated with other factors besides antimicrobial resistance.

• Mastitis Staphylococcus spp. mastite

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Guimarães G., França C.A., Krug F.S., Peixoto R.M., Krewer C.C., Lazzari A.M. & Costa M.M. 2012. [Phemotypic characterization, biofilm production and antimicrobial resistance of Staphylococcus spp. Isolates from cattle and buffaloes mastitis.] Caracterização fenotípica, produção de biofilme e caracterização da resistência aos antimicrobianos em isolados de Staphylococcus spp. obtidos de casos de mastite em bovinos e bubalinos. Pesquisa Veterinária Brasileira 32(12):1219-1224. Universidade Federal do Vale do São Francisco, Campus Ciências Agrárias, Rodov. BR 407 Km 12, Lote 543, Projeto de Irrigação Senador Nilo Coelho s/n, Petrolina, PE 56300-990, Brazil. E-mail: mateus.costa@univasf.edu.br No presente estudo, objetivou-se avaliar a suscetibilidade aos principais antimicrobianos e realizar uma caracterização fenotípica e genotípica de isolados de Staphy- lococcus spp. obtidos de casos de mastite em vacas (n=30) e búfalas (n=30). A suscetibilidade foi avaliada pela técnica de disco-difusão e a presença de bomba de efluxo foi avaliada utilizando-se Ágar Mueller Hinton (MH) adicionado de brometo de etídeo e pesquisa do gene msrA. Pela técnica da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) ainda foram identificados os genes mecA, blaZ e ermA, B e C, que posteriormente foram associados com os métodos fenotípicos para a identificação de resistência a antimicrobianos. A caracterização da formação de biofilme foi realizada utilizando-se os métodos Ágar Vermelho Congo (CRA), Aderência em Placa e a identificação do gene icaD. Pelo método de disco-difusão, os Staphylococcus spp. apresentaram alta sensibilidade aos antimicrobianos. O índice de resistência múltipla aos antimicrobianos (IRMA) apresentou variação de 0 a 0,5. Na pesquisa de bomba de efluxo, 26,7% das amostras foram positivas ao método fenotípico e 6,7% ao método genotípico (gene msrA). Os genes erm, mecA e blaZ foram detectados, respectivamente, em 1,7%, 6,7% e 11,7% das amostras de Staphylococcus spp. Na produção de biofilme, 23,3% dos isolados foram considerados positivos no CRA, 50,0% na Aderência em Placas e 8,3% na PCR pela detecção do gene icaD. Observou-se que os isolados obtidos de amostras bovinas apresentaram uma menor sensibilidade aos antimicrobianos no teste de disco-difusão quando comparados com as amostras bubalinas. A caracterização destes isolados é importante para orientar uma antibioticoterapia bem planejada. A presença de biofilme nos isolados pode estar associada a outros fatores que não a resistência às drogas antimicrobianas.

Abstract in English:

Rhodococcus equi seroepidemiological studies were conducted. Sera used were collected from 290 apparently clinically normal mares and foals. The samples originated from 6 horsebreeding farms, located in the county of Bagé, Rio Grande do Sul, Brazil, which had diferente histories of Rhodococcus equi infections. To correlate the serological results with the presence of the agent in the intestine 123 fecal samples were collected. The synergistic hemolysis inhibition test was used. The test detects antibody against the "equi factor". Neutralizing antibodies against the equi factor were verified in 87.93% (255/290) of the animales tested. The geometric mean titer (GMT) of antibodies was higher in the foals when comparad with the mares. The serological results had a correlation with the isolation of R-. equi in the feces. The rate of R. equi isolation and GMT titers was higher at the horse-breeding farm where clinical cases were registered. Further studies need to be done to establish the relation among the importance of serological titers and disease detection.

• Horses serology synergistic hemolysis inhibition

Abstract in Portuguese:

Com o objetivo de avaliar a situação soroepidemiológica da infecção por Rhodococcus equi na região de Bagé, RS, foram testadas 290 amostras de soro sanguíneo de éguas e potros aparentemente sadios, obtidos de 6 haras com diferentes histórias de rodococose. Para relacionar o resultado sorológico com a presença deste agente bacteriano no trato intestinal destes animais, foram coletadas 123 amostras de fezes. O teste sorológico utilizado foi a inibição da hemólise sinérgica (IHS) que detecta anticorpos neutralizantes contra o "fator equi". Um percentual de 87,93% (255/290) dos animais amostrados apresentaram estes anticorpos. O título médio geométrico (GMT) destes anticorpos foi mais elevado nos potros do que nas éguas. A soropositividade destes equinos ao teste sorológico teve correlação com o isolamento do R. equi nas fezes dos respectivos animais. A maior taxa de isolamento de R. equi das fezes dos equinos e o maior GMT, ocorreu no único haras com casos clínicos recentes de enfermidade causada por esta bactéria. No entanto, todos os animais deste e dos demais haras, encontravam-se aparentemente sadios, sendo necessário, estabelecer em trabalho futuro, a possível relação entre títulos de anticorpos e sua importância na detecção da enfermidade.

• Equinos sorologia inibição da hemólise sinérgica

Abstract in English:

Five calves of mixed zebu breed, 3 to 4 months old, with active periodontal lesions of "cara inchada" (CI) were confined, during 4 and a half months, to a covered corral on a farm where the disease has been a problem, in the Rondonópolis area of northem Mato Grosso, Brazil. The calves were milk-fed on cows which were kept graúng on Panicum maximum pasture known to induce a relatively high prevalence of CI (more than 30 per cent). As roughage the calves received native grass cut daily in a near "cerrado" (savanna) area. On this type of natural pasture the disease has never been observed. The periodontal lesions of the five animals persisted or worsened, and two of them died. These observations, toghether with data from former studies, suggest that a determinating factor of CI may exist also in the milk of cows kept on pastures where the disease occurs.

• Cara inchada periodontal disease periodontitis cattle calves milk

Abstract in Portuguese:

Cinco bezerros, mestiços zebu, de 3 e 4 meses de idade, com lesões peridentárias ativas da "cara inchada" (CI), foram confinados num curral de fazenda com o problema da doença, na região de Rondonópolis, Mato Grosso, durante 4 meses e meio. Os bezerros foram amamentados pelas respectivas mães mantidas em pastos com prevalência realtivamente alta de CI (mais que 30%), as quais eram levadas ao curral duas vezes ao dia; como volumoso os bezerros receberam, no cocho, capim nativo recentemente cortado em área sob vegetação de cerrado, dentro da própria fazenda. A CI nunca foi observada em bezerros criados neste tipo de pastagem. As lesões peridentárias destes bezerros persistiram ou se agravaram e dois dos animais morreram. Estas observações, em conjunto com os dados obtidos em outros estudos anteriores, sugerem que o fator determinante da CI existia também no leite de vacas mantidas em pasto positivo para a doença.

• Cara inchada doença peridentária periodontite bovinos bezerros leite

Abstract in English:

The fresh leaves of Lantana tiliaefolia and L. camara var. nivea, collected respectively, in Cáceres in the State of Mato Grosso, and in Cabo Frio in the State of Rio de Janeiro, where severe outbreaks of photosensitization with high mortality in cattle had occurred, were given by mouth to bovines. The fresh leaves of L. camara var. aculeata collected in Vassouras and Itaguaí, also in the State of Rio de Janeiro, where no cases of photosensitization had been recorded, were also administered to bovines. In these experiments only the leaves from Cáceres and Cabo Frio were poisonous, causing the sarne hepatogenous photosensitization seen under natural conditions. Doses of 30 to 50 g of the fresh leaves/kg of body weight caused severe poisoning, whether given on one day or dubdivided into 5 daily doses. These doses given over a greater time span or smallar doses given once caused less severe poisoning. The symptoms which were observed in the first phase, when several animals died, lasted up to 15 days. They were: anorexia, restlessness, diminished or absence of rumen movements, photosensitization, with erythema and edema of the skin, jaundice, brown urine and scanty, dry feces. In the second phase that followed, there was mummification with the appearance of cracks and sloughing-off of pieces of skin, and occurrence of open, foul-smelling lesions. All other symptoms had disappeared. The main post-mortem finding in the animals which had died during the first phase was jaundice. The most important histopathological changes were found in the liver and kidney. The liver cells were swollen with foci of degeneration throughout the lobules. There was proliferation of the epithelial cells of the bile ducts, while in the kidneys, degeneration and lysis of the epithelial cells of the uriniferous tubules of the cortex was observed. Small foci of necrosis were present in the myocardium of one bovine. Although Lantana spp. are found throughout Brazil, it appears that the occurrence of mortality caused by the shrub is relatively rare. Based on the present study and on data from the literature, it would seem that in order for Lantana spp. poisoning to occur in the field, two conditions must be present: shipping and hunger of cattle.

• Poisonous plants Lantana spp. Lantana camara var. aculeata Lantana camara var. nivea Lantana tiliaefolia Verbenaceae experimental plant poisoning cattle pathology

Abstract in Portuguese:

Foram administradas por via oral, a bovinos jovens, as folhas frescas de Lantana tiliaefolia e L. camara var. nivea, procedentes respectivamente de Cáceres, Mato Grosso, e Cabo Frio, Rio de Janeiro, onde tinham ocorrido graves surtos de fotossensibilização com alta mortalidade em bovinos, e de L. camara var. aculeata, procedentes de Vassouras e Itaguaí, Rio de Janeiro, onde não havia históricos desta natureza. Nesses experimentos só as folhas procedentes de Cáceres e Cabo Frio se revelaram tóxicas, reproduzindo-se com elas o quadro de fotossensibilização hepatógena observado sob condições naturais. A administração de 30 a 50 g/kg, dadas de uma só vez ou subdivididas em até 5 doses diárias, causaram quadro grave de intoxicação. Essas doses, subdivididas em período maior, ou doses únicas menores causaram quadros de intoxicação menos graves. Os sintomas observados foram numa primeira fase com duração de até 15 dias - em que alguns animais morreram - anorexia, diminuição ou parada dos movimentos do rúmen, manifestações de fofossensibilização sob forma de eritema e edema, inquietação, icterícia, urina de cor marrom, fezes ressequidas; numa segunda fase que se seguia, havia mumificação com aparecimento de fendas e desprendimento de fragmentos da pele e ocorrência de feridas abertas com mau cheiro, tendo desaparecido todos os outros sintomas. Nos bovinos que morreram durante a primeira fase da intoxicação, o principal achado de necropsia foi icterícia generalizada. As principais alterações histopatológicas encontradas foram: no fígado, proliferação das células epiteliais das vias biliares, tumefação das células hepáticas, com focos de distribuição difusa pelos lóbulos em que as células hepáticas apresentavam processos degenerativos; no rim, degeneração e lise das células epiteliais dos túbulos uriníferos da cortical; no miocárdio de um bovino havia pequenos focos de necrose. É observado que, apesar de Lantana spp. ocorrer em todo o Brasil, aparentemente é relativamente rara a ocorrência de mortalidade por plantas deste gênero em bovinos. Em face dos dados obtidos no presente estudo e colhidos na literatura, parecem ser necessários dois fatores, para que ocorra a intoxicação por Lantana spp. sob condições naturais, transferência de bovinos e fome, além do fato de tratar-se de uma lantana tóxica e a planta existir em quantidade suficientemente grande na área.

• Plantas tóxicas Lantana spp. Lantana camara var. aculeata Lantana camara var. nivea Lantana tiliaefolia Verbenaceae intoxicação por planta bovinos patologia